AbstractoEl experimento se realizó para estudiar los efectos de la diludina en el rendimiento de puesta y la calidad del huevo en gallinas y para abordar el mecanismo de los efectos mediante la determinación de índices de parámetros de huevo y suero. Se dividieron 1024 gallinas ROM en cuatro grupos, cada uno con cuatro réplicas de 64 gallinas. Los grupos de tratamiento recibieron la misma dieta basal suplementada con 0, 100, 150 y 200 mg/kg de diludina, respectivamente, durante 80 días. Los resultados fueron los siguientes: la adición de diludina a la dieta mejoró el rendimiento de puesta de las gallinas, siendo el tratamiento de 150 mg/kg el mejor; su tasa de puesta aumentó un 11,8% (p < 0,01), mientras que la conversión de masa de huevo disminuyó un 10,36% (p < 0,01). El peso de los huevos aumentó con el incremento de la diludina añadida. La diludina disminuyó significativamente la concentración sérica de ácido úrico (p < 0,01); la adición de diludina disminuyó significativamente la concentración sérica de Ca2+y el contenido de fosfato inorgánico, y aumentó la actividad de la fosfatasa alquina (ALP) del suero (p < 0,05), por lo que tuvo efectos significativos en la reducción de la rotura de huevos (p < 0,05) y la anormalidad (p < 0,05); la diludina aumentó significativamente la altura de la albúmina. Valor de Haugh (p < 0,01), el grosor de la cáscara y el peso de la cáscara (p < 0,05), 150 y 200 mg/kg de diludina también disminuyeron el colesterol total en la yema de huevo (p < 0,05), pero aumentaron el peso de la yema de huevo (p < 0,05). Además, la diludina pudo aumentar la actividad de la lipasa (p < 0,01) y disminuir el contenido de triglicéridos (TG3) (p < 0,01) y colesterol (CHL) (p < 0,01) en suero; redujo el porcentaje de grasa abdominal (p < 0,01) y el contenido de grasa hepática (p < 0,01), y tuvo la capacidad de prevenir el hígado graso en las gallinas. La diludina aumentó significativamente la actividad de la SOD en suero (p < 0,01) cuando se añadió a la dieta durante más de 30 días. Sin embargo, no se encontraron diferencias significativas en las actividades de GPT y GOT en suero entre el grupo control y el grupo tratado. Se infirió que la diludina podría prevenir la oxidación de la membrana celular.
Palabras claveDiludina; gallina; SOD; colesterol; triglicérido, lipasa
La diludina es un nuevo aditivo vitamínico antioxidante no nutritivo y tiene los efectos[1-3]de frenar la oxidación de la membrana biológica y estabilizar el tejido de las células biológicas, etc. En la década de 1970, el experto agrícola de Letonia en la antigua Unión Soviética descubrió que la diludina tenía los efectos[4]de promover el crecimiento de las aves de corral y resistir la congelación y el envejecimiento de algunas plantas. Se informó que la diludina no solo podía promover el crecimiento animal, sino que mejoraba el rendimiento reproductivo del animal de manera evidente y mejoraba la tasa de preñez, la producción de leche, la producción de huevos y la tasa de eclosión de la hembra animal.[1, 2, 5-7]El estudio de la diludina en China comenzó en la década de 1980, y la mayoría de los estudios sobre la diludina en China se han limitado hasta ahora a su efecto de uso, y se han reportado pocos ensayos en gallinas ponedoras. Chen Jufang (1993) informó que la diludina podría mejorar la producción de huevos y el peso de los huevos de las aves de corral, pero no profundizó en[5]el estudio de su mecanismo de acción. Por lo tanto, implementamos el estudio sistemático del efecto y su mecanismo alimentando a las gallinas ponedoras con una dieta suplementada con diludina, y una parte de los resultados se informa a continuación:
Tabla 1. Composición y componentes nutricionales de la dieta experimental.
%
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Composición de la dieta Componentes nutricionales
----------------------------------------------------------------------------------------------
Maíz 62 ME③ 11.97
Pulpa de frijol 20 CP 17.8
Harina de pescado 3 Ca 3.42
Harina de colza 5 P 0,75
Harina de huesos 2 M et 0,43
Harina de piedra 7,5 M y Cys 0,75
Metionina 0,1
Sal 0,3
Multivitamínico① 10
Elementos traza② 0,1
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① Multivitamínico: 11 mg de riboflavina, 26 mg de ácido fólico, 44 mg de orizanina, 66 mg de niacina, 0,22 mg de biotina, 66 mg de B6, 17,6 µg de B12, 880 mg de colina, 30 mg de vitamina K, 66 UI de vitamina B12.E, 6600 UCI de VDy 20000 UCI de VA, se añaden a cada kilogramo de la dieta; y se añaden 10 g de multivitaminas a cada 50 kg de la dieta.
② Oligoelementos (mg/kg): Se añaden 60 mg de Mn, 60 mg de Zn, 80 mg de Fe, 10 mg de Cu, 0,35 mg de I y 0,3 mg de Se a cada kilogramo de la dieta.
③ La unidad de energía metabolizable se refiere a MJ/kg.
1. Materiales y método
1.1 Material de prueba
La empresa Beijing Sunpu Biochem. & Tech. Co., Ltd. deberá suministrar la diludina; y el animal de prueba deberá ser una gallina ponedora comercial romana de 300 días de edad.
Dieta experimental: la dieta experimental debe prepararse de acuerdo con las condiciones reales durante la producción, según la norma NRC, como se muestra en la Tabla 1.
1.2 Método de ensayo
1.2.1 Experimento de alimentación: El experimento de alimentación se llevará a cabo en la granja de la Compañía Hongji en la ciudad de Jiande. Se seleccionarán 1024 gallinas ponedoras romanas y se dividirán aleatoriamente en cuatro grupos de 256 ejemplares cada uno (cada grupo se repetirá cuatro veces y cada gallina 64 veces). Las gallinas serán alimentadas con cuatro dietas con diferentes contenidos de diludina, añadiendo 0, 100, 150 y 200 mg/kg de alimento a cada grupo. El experimento comenzó el 10 de abril de 1997 y las gallinas tuvieron acceso libre a alimento y agua. Se registrará la cantidad de alimento consumido por cada grupo, la tasa de puesta, la producción de huevos, los huevos rotos y el número de huevos anormales. El experimento finalizó el 30 de junio de 1997.
1.2.2 Medición de la calidad del huevo: Se deben tomar 20 huevos al azar cuando se implemente la prueba durante 40 días para medir los indicadores relacionados con la calidad del huevo, tales como el índice de forma del huevo, la unidad Haugh, el peso relativo de la cáscara, el grosor de la cáscara, el índice de la yema, el peso relativo de la yema, etc. Además, se debe medir el contenido de colesterol en la yema utilizando el método COD-PAP en presencia del reactivo Cicheng producido por la planta de pruebas bioquímicas Ningbo Cixi.
1.2.3 Medición de los índices bioquímicos séricos: Se deben tomar 16 gallinas de prueba de cada grupo cada vez que se implemente la prueba durante 30 días y al finalizar la prueba para preparar el suero después de tomar una muestra de sangre de la vena del ala. El suero debe almacenarse a baja temperatura (-20 °C) para medir los índices bioquímicos relevantes. El porcentaje de grasa abdominal y el contenido de lípidos del hígado deben medirse después del sacrificio y la extracción de la grasa abdominal y el hígado una vez finalizada la toma de muestras de sangre.
La superóxido dismutasa (SOD) debe medirse utilizando el método de saturación en presencia del kit de reactivos producido por el Instituto de Investigación Bioquímica y Tecnológica de Beijing Huaqing. El ácido úrico (UN) en el suero debe medirse utilizando el método Uricase-PAP en presencia del kit de reactivos Cicheng; el triglicérido (TG3) debe medirse utilizando el método de un paso GPO-PAP en presencia del kit de reactivos Cicheng; la lipasa debe medirse utilizando la nefelometría en presencia del kit de reactivos Cicheng; el colesterol total sérico (CHL) debe medirse utilizando el método COD-PAP en presencia del kit de reactivos Cicheng; la transaminasa glutámico-pirúvica (GPT) debe medirse utilizando la colorimetría en presencia del kit de reactivos Cicheng; la transaminasa glutámico-oxalacética (GOT) debe medirse utilizando la colorimetría en presencia del kit de reactivos Cicheng; La fosfatasa alcalina (ALP) debe medirse utilizando el método de velocidad en presencia del kit de reactivos de Cicheng; el ion calcio (Ca2+) en suero debe medirse utilizando el método del complejo azul de metiltimol en presencia del kit de reactivos de Cicheng; el fósforo inorgánico (P) debe medirse utilizando el método del azul de molibdato en presencia del kit de reactivos de Cicheng.
2 Resultado de la prueba
2.1 Efecto sobre el rendimiento de la colocación
En la Tabla 2 se muestran los resultados de puesta de los diferentes grupos procesados mediante el uso de diludina.
Tabla 2 Rendimiento de gallinas alimentadas con dieta basal suplementada con cuatro niveles de diludina
| Cantidad de diludina a añadir (mg/kg) | ||||
| 0 | 100 | 150 | 200 | |
| ingesta de alimento (g) |  | |||
| Tasa de puesta (%) | ||||
| Peso medio del huevo (g) | ||||
| Relación entre el material y el huevo | ||||
| Tasa de huevos rotos (%) | ||||
| Tasa de óvulos anormales (%) | ||||
De la Tabla 2, las tasas de puesta de todos los grupos procesados con diludina mejoran notablemente, siendo el efecto óptimo cuando se procesa con 150 mg/kg (hasta un 83,36 %), y se mejora un 11,03 % (p < 0,01) en comparación con el grupo de referencia; por lo tanto, la diludina tiene el efecto de mejorar la tasa de puesta. Observado a partir del peso promedio del huevo, el peso del huevo aumenta (p > 0,05) a medida que aumenta la diludina en la dieta diaria. En comparación con el grupo de referencia, la diferencia entre todas las partes procesadas de los grupos procesados con 200 mg/kg de diludina no es evidente cuando se agrega un promedio de 1,79 g de ingesta de alimento; Sin embargo, la diferencia se hace más evidente gradualmente con el aumento de diludina, y la diferencia de la proporción de material a huevo entre las partes procesadas es evidente (p<0,05), y el efecto es óptimo cuando 150 mg/kg de diludina y es 1,25:1 que se reduce en un 10,36 % (p<0,01) en comparación con el grupo de referencia. Observado por la tasa de huevos rotos de todas las partes procesadas, la tasa de huevos rotos (p<0,05) puede reducirse cuando se agrega diludina a la dieta diaria; y el porcentaje de huevos anormales se reduce (p<0,05) con el aumento de diludina.
2.2 Efecto sobre la calidad del huevo
Como se observa en la Tabla 3, el índice de forma del huevo y la gravedad específica del huevo no se ven afectados (p>0,05) cuando se agrega diludina a la dieta diaria, y el peso de la cáscara aumenta a medida que aumenta la diludina agregada a la dieta diaria, donde los pesos de las cáscaras aumentan en un 10,58 % y un 10,85 % (p<0,05) respectivamente en comparación con los grupos de referencia cuando se agregan 150 y 200 mg/kg de diludina; el grosor de la cáscara del huevo aumenta a medida que aumenta la diludina en la dieta diaria, donde el grosor de la cáscara del huevo aumenta en un 13,89 % (p<0,05) cuando se agregan 100 mg/kg de diludina en comparación con los grupos de referencia, y los grosores de las cáscaras de los huevos aumentan en un 19,44 % (p<0,01) y un 27,7 % (p<0,01) respectivamente cuando se agregan 150 y 200 mg/kg. La unidad Haugh (p<0,01) mejora notablemente al añadir diludina, lo que indica que la diludina promueve la síntesis de albúmina espesa de la clara de huevo. La diludina mejora el índice de la yema, pero la diferencia no es significativa (p<0,05). El contenido de colesterol de la yema de huevo de todos los grupos es diferente y se reduce notablemente (p<0,05) tras añadir 150 y 200 mg/kg de diludina. El peso relativo de la yema es diferente según la cantidad de diludina añadida, observándose una mejora del 18,01 % y del 14,92 % (p<0,05) con 150 mg/kg y 200 mg/kg, respectivamente, en comparación con el grupo de referencia; por lo tanto, la diludina adecuada promueve la síntesis de la yema de huevo.
Tabla 3 Efectos de la diludina sobre la calidad del huevo
| Cantidad de diludina a añadir (mg/kg) | ||||
| Calidad del huevo | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Índice de forma de huevo (%) |  | |||
| Densidad específica del huevo (g/cm3) | ||||
| Peso relativo de la cáscara del huevo (%) | ||||
| Grosor de la cáscara del huevo (mm) | ||||
| Unidad Haugh (U) | ||||
| Índice de yema de huevo (%) | ||||
| Colesterol de la yema de huevo (%) | ||||
| Peso relativo de la yema de huevo (%) | ||||
2.3 Efectos sobre el porcentaje de grasa abdominal y el contenido de grasa hepática de las gallinas ponedoras
Consulte las figuras 1 y 2 para observar los efectos de la diludina sobre el porcentaje de grasa abdominal y el contenido de grasa hepática de las gallinas ponedoras.
Figura 1. Efecto de la diludina sobre el porcentaje de grasa abdominal (PAF) de gallinas ponedoras.
| Porcentaje de grasa abdominal | |
| Cantidad de diludina a añadir |
Figura 2. Efecto de la diludina sobre el contenido de grasa hepática (HG) de gallinas ponedoras.
| Contenido de grasa hepática | |
| Cantidad de diludina a añadir |
Como se observa en la Figura 1, los porcentajes de grasa abdominal del grupo de prueba se reducen en un 8,3 % y un 12,11 % (p < 0,05) respectivamente cuando se administran 100 y 150 mg/kg de diludina en comparación con el grupo de referencia, y el porcentaje de grasa abdominal se reduce en un 33,49 % (p < 0,01) cuando se añaden 200 mg/kg de diludina. Como se observa en la Figura 2, el contenido de grasa hepática (absolutamente seca) procesada por 100, 150 y 200 mg/kg de diludina respectivamente se reduce en un 15,00 % (p < 0,05), un 15,62 % (p < 0,05) y un 27,7 % (p < 0,01) respectivamente en comparación con el grupo de referencia; Por lo tanto, la diludina tiene el efecto de reducir el porcentaje de grasa abdominal y el contenido de grasa hepática del contenido de puesta, siendo el efecto óptimo cuando se añaden 200 mg/kg de diludina.
2.4 Efecto sobre el índice bioquímico sérico
Como se observa en la Tabla 4, la diferencia entre las partes procesadas durante la Fase I (30d) de la prueba SOD no es evidente, y los índices bioquímicos séricos de todos los grupos a los que se les añade diludina en la Fase II (80d) de la prueba son superiores al grupo de referencia (p<0,05). El ácido úrico (p<0,05) en el suero puede reducirse cuando se añaden 150 mg/kg y 200 mg/kg de diludina; mientras que el efecto (p<0,05) está disponible cuando se añade 100 mg/kg de diludina en la Fase I. La diludina puede reducir los triglicéridos en el suero, donde el efecto es óptimo (p<0,01) en el grupo cuando se añade 150 mg/kg de diludina en la Fase I, y es óptimo en el grupo cuando se añade 200 mg/kg de diludina en la Fase II. El colesterol total en el suero se reduce al aumentar la diludina añadida a la dieta diaria, más específicamente, los contenidos de colesterol total en el suero se reducen en un 36,36% (p<0,01) y un 40,74% (p<0,01) respectivamente cuando se añaden 150 mg/kg y 200 mg/kg de diludina en la Fase I en comparación con el grupo de referencia, y se reducen en un 26,60% (p<0,01), un 37,40% (p<0,01) y un 46,66% (p<0,01) respectivamente cuando se añaden 100 mg/kg, 150 mg/kg y 200 mg/kg de diludina en la Fase II en comparación con el grupo de referencia. Además, la ALP aumenta con el incremento de diludina añadida a la dieta diaria, mientras que los valores de ALP en el grupo al que se añaden 150 mg/kg y 200 mg/kg de diludina son obviamente más altos que el grupo de referencia (p<0,05).
Tabla 4. Efectos de la diludina sobre los parámetros séricos.
| Cantidad de diludina que se debe añadir (mg/kg) en la Fase I (30 días) de la prueba. | ||||
| Artículo | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superóxido dismutasa (mg/mL) |  | |||
| Ácido úrico | ||||
| Triglicéridos (mmol/L) | ||||
| Lipasa (U/L) | ||||
| Colesterol (mg/dL) | ||||
| Transaminasa glutámico-pirúvica (U/L) | ||||
| Transaminasa glutámico-oxalacética (U/L) | ||||
| Fosfatasa alcalina (mmol/L) | ||||
| Iones de calcio (mmol/L) | ||||
| Fósforo inorgánico (mg/dL) | ||||
| Cantidad de diludina que se añadirá (mg/kg) en la Fase II (80 días) de la prueba. | ||||
| Artículo | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superóxido dismutasa (mg/mL) |  | |||
| Ácido úrico | ||||
| Triglicéridos (mmol/L) | ||||
| Lipasa (U/L) | ||||
| Colesterol (mg/dL) | ||||
| Transaminasa glutámico-pirúvica (U/L) | ||||
| Transaminasa glutámico-oxalacética (U/L) | ||||
| Fosfatasa alcalina (mmol/L) | ||||
| Iones de calcio (mmol/L) | ||||
| Fósforo inorgánico (mg/dL) | ||||
3. Análisis y discusión
3.1 La diludina en la prueba mejoró la tasa de puesta, el peso del huevo, la unidad Haugh y el peso relativo de la yema, lo que indicó que la diludina tuvo efectos de promover la asimilación de la proteína y mejorar la cantidad de síntesis de albúmina espesa de la clara de huevo y proteína de la yema. Además, el contenido de ácido úrico en el suero se redujo notablemente; y se reconoció generalmente que la reducción del contenido de nitrógeno no proteico en el suero significaba que la velocidad del catabolismo de la proteína se redujo y el tiempo de retención del nitrógeno se retrasó. Este resultado proporcionó la base para aumentar la retención de proteínas, promover la puesta de huevos y mejorar el peso del huevo de las gallinas ponedoras. El resultado de la prueba señaló que el efecto de puesta es óptimo cuando se añadieron 150 mg/kg de diludina, lo que fue esencialmente consistente con el resultado[6,7]de Bao Erqing y Qin Shangzhi y adquirido mediante la adición de diludina en el período tardío de las gallinas ponedoras. El efecto se redujo cuando la cantidad de diludina superó los 150 mg/kg, lo que puede deberse a la transformación de proteínas.[8]Se vio afectado debido a una dosis excesiva y a la sobrecarga metabólica del órgano con la diludina.
3.2 La concentración de Ca2+En el suero del huevo ponedor se redujo, el P en el suero se redujo al principio y la actividad de ALP aumentó notablemente en presencia de diludina, lo que indicó que la diludina afectó notablemente el metabolismo del Ca y el P. Yue Wenbin informó que la diludina podría promover la absorción[9] de elementos minerales Fe y Zn; ALP existía principalmente en tejidos, como el hígado, el hueso, el tracto intestinal, el riñón, etc.; ALP en el suero provenía principalmente del hígado y el hueso; ALP en el hueso existía principalmente en el osteoblasto y podía combinar el ion fosfato con el Ca2 del suero después de la transformación al promover la descomposición del fosfato y aumentar la concentración del ion fosfato, y se depositaba en el hueso en forma de hidroxiapatita, etc. para conducir a la reducción de Ca y P en el suero, lo cual es consistente con el aumento del grosor de la cáscara del huevo y el peso relativo de la cáscara del huevo en los indicadores de calidad del huevo. Además, la tasa de huevos rotos y el porcentaje de huevos anormales se redujeron obviamente en términos del rendimiento de la puesta, lo que también explica este punto.
3.3 La acumulación de grasa abdominal y el contenido de grasa hepática de las gallinas ponedoras se redujeron notablemente al añadir diludina a la dieta, lo que indicó que la diludina tenía el efecto de inhibir la síntesis de grasa corporal. Además, la diludina podría mejorar la actividad de la lipasa en el suero en la etapa temprana; la actividad de la lipasa aumentó notablemente en el grupo al que se añadieron 100 mg/kg de diludina, y los contenidos de triglicéridos y colesterol en el suero se redujeron (p<0,01), lo que indicó que la diludina podría promover la descomposición de los triglicéridos e inhibir la síntesis de colesterol. La acumulación de grasa podría inhibirse debido a la enzima del metabolismo lipídico en el hígado.[10,11]y la reducción del colesterol en la yema del huevo también explica este punto [13]. Chen Jufang informó que la diludina podía frenar la formación de grasa en el animal y mejorar el porcentaje de carne magra de los pollos de engorde y los cerdos, y tenía el efecto de tratar el hígado graso. El resultado de la prueba aclaró este mecanismo de acción, y los resultados de la disección y observación de las gallinas de prueba también demostraron que la diludina podía reducir la tasa de aparición de hígado graso en las gallinas ponedoras de manera evidente.
3.4 GPT y GOT son dos indicadores importantes que reflejan las funciones del hígado y el corazón, y el hígado y el corazón pueden dañarse si sus actividades son demasiado altas. Las actividades de GPT y GOT en el suero no cambiaron obviamente cuando se agregó diludina en la prueba, lo que indicó que el hígado y el corazón no estaban dañados; además, el resultado de la medición de SOD mostró que la actividad de SOD en el suero podía mejorar notablemente cuando se usó diludina durante un cierto tiempo. SOD se refiere al principal eliminador del radical libre superóxido en el cuerpo; es importante para mantener la integridad de la membrana biológica, mejorar la capacidad de inmunidad del organismo y mantener la salud del animal cuando aumenta el contenido de SOD en el cuerpo. Quh Hai, et al. informaron que la diludina podría mejorar la actividad de la 6-glucosa fosfato deshidrogenasa en la membrana biológica y estabilizar los tejidos [2] de la célula biológica. Sniedze señaló que la diludina restringió la actividad [4] de la NADPH citocromo C reductasa de manera evidente después de estudiar la relación entre la diludina y la enzima relevante en la cadena de transferencia de electrones específica de NADPH en microsomas de hígado de rata. Odydents también señaló que la diludina estaba relacionada [4] con el sistema de oxidasa compuesta y la enzima microsomal relacionada con NADPH; y el mecanismo de acción de la diludina después de ingresar al animal es desempeñar un papel de resistencia a la oxidación y protección de la membrana biológica [8] al interceptar la actividad de la enzima de transferencia de electrones NADPH del microsoma y restringir el proceso de peroxidación del compuesto lipídico. El resultado de la prueba demostró que la función protectora de la diludina a la membrana biológica de los cambios en la actividad de SOD a los cambios en las actividades de GPT y GOT y demostró los resultados del estudio de Sniedze y Odydents.
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Fecha de publicación: 7 de junio de 2021
